摘要:為掌握江蘇省豆類作物上的病毒病種類,本研究于2018年對江蘇省蠶豆作物病毒進行了調(diào)查,累計采集田間疑似病樣55份,為明確其中伴隨的病毒種類,我們對田間采集的疑似病樣提取總RNA后進行了分子檢測,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在用菜豆黃花葉病毒(Bean yellow mosaic virus,BYMV)檢測引物進行RT?PCR擴增時有16份樣品擴增到1條525 bp左右的條帶,與目的片段大小一致,說明其中可能伴隨有菜豆黃花葉病毒的感染。為進一步確定這一結(jié)果,我們針對BYMV CP基因設計了引物,以陽性樣品RNA為模板進行RT?PCR,結(jié)果發(fā)現(xiàn)均擴增到預期大小的目的條帶,對該片段回收、克隆并測定堿基序列,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其CP基因堿基序列全長819 bp,編碼1個由273個氨基酸組成大小約20 800的蛋白質(zhì)。BLAST分析結(jié)果顯示其與BYMV同源性最高(AB439731,99%),表明其屬于BYMV的一個分離物。利用MEGA軟件對其進行系統(tǒng)進化分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些分離物與日本的蠶豆分離物(AB439731)同源性最高,其次是澳大利亞的蠶豆分離物(HG970867)和中國青海的菜豆分離物(9?16)。這些結(jié)果表明江蘇蠶豆上檢測到的病毒是菜豆黃花葉病毒的一個分離物,這是該病毒在江蘇侵染蠶豆的首次分子鑒定報道。
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