摘要：旨在揭示山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染氣管上皮細胞后是否可誘導細胞發(fā)生凋亡,并對細胞凋亡的信號通路進行初步探究。本研究將CPIV3病毒液接種氣管上皮細胞,在12、24、36、48、72和96 h收集培養(yǎng)物上清檢測病毒增殖滴度;通過形態(tài)學觀察CPIV3誘導氣管上皮細胞病變(CPE)情況;采用Annexin V-FITC/PI雙染細胞凋亡檢測試劑盒和Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性檢測試劑盒檢測凋亡水平及相關指標;熒光定量PCR檢測細胞凋亡分子mRNA表達水平;Western blot分析激活型Caspase-3蛋白表達變化情況。結果顯示,CPIV3在氣管上皮細胞中的增殖呈上升趨勢,96 h能達到10 4.50 TCID 50·mL^-1;形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn),病毒接種后48 h出現(xiàn)細胞收縮變圓、脫落等CPE現(xiàn)象;流式細胞術檢測及Caspase活性檢測表明,感染組細胞出現(xiàn)細胞凋亡,48 h后細胞凋亡率達19.66%,且Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性隨著時間延長逐漸升高;死亡受體凋亡途徑和線粒體凋亡途徑細胞凋亡因子mRNA表達上調。Western blot分析揭示,激活型Caspase-3蛋白在病毒感染過程中被活化。本研究證實CPIV3感染可誘導氣管上皮細胞凋亡,且Caspase途徑在病毒誘導細胞凋亡的過程中發(fā)揮重要作用。