摘要：為明確浙江省桐鄉(xiāng)市發(fā)生的杭白菊葉枯病的病原菌,采用傳統(tǒng)組織分離法對采集的病樣進(jìn)行病原菌分離,在測定其致病性的同時(shí),結(jié)合形態(tài)學(xué)特征及基于核糖體內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS)、nrDNA大亞基(LSU)和β-微管蛋白基因(TUB2)的聯(lián)合系統(tǒng)發(fā)育分析對該病原菌進(jìn)行鑒定,并測定其對多菌靈的抗性。結(jié)果表明,從杭白菊葉枯病病樣中共分離到35株菌株,在回接試驗(yàn)中杭白菊表現(xiàn)出的癥狀與田間自然發(fā)病癥狀一致,證明分離到的菌株為引起杭白菊葉枯病的病原菌。該病原菌菌絲生長初期為淡黃色,后為灰白色;培養(yǎng)25 d后菌落上的黑色球形分生孢子器產(chǎn)生大量液體狀的淡粉色分生孢子堆;分生孢子為單胞、無色、長橢圓形,大小(n=200)為2.8~4.9μm×1.2~3.0μm,初步判斷該病原菌是莖點(diǎn)霉屬Phoma真菌P. bellidis?；贗TS、LSU、TUB2聯(lián)合系統(tǒng)發(fā)育分析的分子鑒定結(jié)果與形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果一致,確定引起該病害的病原菌為P. bellidis。該病原菌對多菌靈的抗性頻率為94.3%,且全部為高水平抗性菌株,抗藥性機(jī)制為其TUB2的E198A突變,即TUB2的第198位密碼子從GAG突變?yōu)镚CG,導(dǎo)致第198位氨基酸從谷氨酸(Glu)突變?yōu)楸彼?Ala)。